Agencia Estatal Boletín Oficial del Estado

LA COMISIÓN DE LAS COMUNIDADES EUROPEAS,

Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad Europea,

Vista la Directiva 98/79/CE del Parlamento Europeo y del Consejo, de 27 de octubre de 1998, sobre productos sanitarios para diagnóstico in vitro (1), y, en particular, su artículo 5, apartado 3, párrafo segundo,

Considerando lo siguiente:

(1) En la Decisión 2002/364/CE de la Comisión se establecen las especificaciones técnicas comunes para productos sanitarios de diagnóstico in vitro (2).

(2) En interés de la salud pública y para adaptarse a los avances técnicos, incluida la evolución del rendimiento y la sensibilidad analítica de dichos productos, procede revisar las especificaciones técnicas comunes establecidas en la Decisión 2002/364/CE.

(3) Hay que detallar la definición de «prueba rápida» para que sea más exacta. En aras de la claridad, conviene incorporar otras definiciones.

(4) Para adaptar las especificaciones técnicas comunes a las actuales prácticas científicas y técnicas es preciso actualizar varias referencias científicas y técnicas.

(5) Deben aclararse los requisitos para las pruebas de cribado del VIH. Para garantizar que los criterios de funcionamiento acordes con la tecnología actual queden reflejados en las especificaciones técnicas comunes, hay que añadir ciertos requisitos a las pruebas combinadas antígeno/anticuerpo del VIH y detallar más los requisitos de muestreo para determinados análisis.

(6) Por consiguiente, debe modificarse en consecuencia el anexo de la Decisión 2002/364/CE y sustituirse en aras de la claridad.

(7) Hay que dar a los fabricantes cuyos productos ya están en el mercado un período de transición para que se adapten a las nuevas especificaciones técnicas comunes.

Por otra parte, en el interés de la salud pública, los fabricantes que lo deseen han de poder aplicar las nuevas especificaciones técnicas comunes antes de que finalice el período de transición.

(8) Las medidas previstas en la presente Decisión se ajustan al dictamen del Comité creado en virtud del artículo 6, apartado 2, de la Directiva 90/385/CEE del Consejo (3).

________________________

(1) DO L 331 de 7.12.1998, p. 1.

(2) DO L 131 de 16.5.2002, p. 17.

(3) DO L 189 de 20.7.1990, p. 17.

HA ADOPTADO LA PRESENTE DECISIÓN:

Artículo 1

El anexo de la Decisión 2002/364/CE se sustituye por el texto que figura en el anexo de la presente Decisión.

Artículo 2

La presente Decisión se aplicará a partir del 1 de diciembre de 2010 a los productos comercializados por primera vez antes del 1 de diciembre de 2009.

Se aplicará a partir del 1 de diciembre de 2009 a los demás productos.

No obstante, los Estados miembros permitirán a los fabricantes aplicar los requisitos establecidos en el anexo antes de las fechas establecidas en los párrafos primero y segundo.

Artículo 3

Los destinatarios de la presente Decisión serán los Estados miembros.

Hecho en Bruselas, el 3 de febrero de 2009.

Por la Comisión

Günter VERHEUGEN

Vicepresidente

ANEXO

«ANEXO

ESPECIFICACIONES TÉCNICAS COMUNES (ETC) PARA PRODUCTOS SANITARIOS DE DIAGNÓSTICO IN VITRO

1. ÁMBITO DE APLICACIÓN

Las especificaciones técnicas comunes establecidas en este anexo son aplicables a los productos enumerados en la lista A del anexo II de la Directiva 98/79/CE.

2. DEFINICIONES Y TÉRMINOS

Sensibilidad (diagnóstica)

La probabilidad de que el producto dé un resultado positivo en presencia de un marcador diana.

Verdadero positivo

Muestra de la que se sabe que es positiva para el marcador diana y que el producto clasifica correctamente.

Falso negativo

Muestra de la que se sabe que es positiva para el marcador diana y que el producto clasifica incorrectamente.

Especificidad (diagnóstica)

La probabilidad de que el producto dé un resultado negativo en ausencia de un marcador diana.

Falso positivo

Muestra de la que se sabe que es negativa para el marcador diana y que el producto clasifica incorrectamente.

Verdadero negativo

Muestra de la que se sabe que es negativa para el marcador diana y que el producto clasifica correctamente.

Sensibilidad analítica

La sensibilidad analítica puede expresarse como el límite de detección, es decir, la cantidad más pequeña del marcador diana que puede ser detectada con precisión.

Especificidad analítica

La capacidad del método para determinar solamente el marcador diana.

Técnicas de amplificación de ácidos nucleicos (NAT) El término “NAT” es utilizado para las pruebas de detección o cuantificación de ácidos nucleicos ya sea por amplificación de una secuencia objetivo, por amplificación de una señal o por hibridación.

Prueba rápida

Por “prueba rápida” se entiende productos sanitarios de diagnóstico in vitro, cualitativo o semicuantitativo, utilizados individualmente o en una serie corta, mediante procedimientos no automatizados, que han sido diseñados para proporcionar un resultado inmediato.

Consistencia

La consistencia de un procedimiento de análisis es una medida de su capacidad para no ser afectado por las variaciones pequeñas pero deliberadas de los parámetros del método, y proporciona una indicación de su fiabilidad durante el uso normal.

Tasa de fallo del sistema

La tasa de fallo del sistema es la frecuencia de fallos cuando el proceso completo se realiza según las indicaciones del fabricante.

Análisis de confirmación

Por análisis de confirmación se entiende el utilizado para confirmar un resultado reactivo de una prueba de cribado.

Análisis de tipado del virus

El que se utiliza para el tipado con muestras positivas ya conocidas, y no para el diagnóstico primario de la infección ni para el cribado.

Muestras de seroconversión al VIH

Se consideran muestras de seroconversión al VIH:

— captación del antígeno p24 o positividad del ARN del VIH,

— reconocimiento por todas las pruebas de cribado de anticuerpos,

— análisis confirmatorios positivos o indeterminados.

Muestras de seroconversión temprana al VIH Se consideran muestras de seroconversión temprana al VIH:

— captación del antígeno p24 o positividad del ARN del VIH,

— no reconocimiento por todas las pruebas de cribado de anticuerpos,

— análisis confirmatorios negativos o indeterminados.

3. ESPECIFICACIONES TÉCNICAS COMUNES (ETC) PARA PRODUCTOS DEFINIDOS EN LA LISTA A DEL ANEXO II DE LA DIRECTIVA 98/79/CE

3.1. ETC para la evaluación del funcionamiento de reactivos y productos reactivos para la detección, confirmación y cuantificación en muestras humanas de marcadores de infección por VIH (VIH 1 y VIH 2), HTLV I y II, y de hepatitis B, C y D

Principios generales

3.1.1. Los productos para la detección de infecciones víricas deberán cumplir los requisitos de sensibilidad y especificidad expuestos en el cuadro 1 tanto si son comercializados para el cribado como si lo son para diagnóstico.

Véase también 3.1.11 en lo relativo a las pruebas de cribado.

3.1.2. Los productos que los fabricantes destinen al análisis de líquidos orgánicos distintos de suero o plasma, como por ejemplo, orina, saliva, etc., cumplirán los mismos requisitos de sensibilidad y especificidad de las ETC que los destinados al suero y el plasma. En la evaluación del funcionamiento se analizarán muestras de los mismos individuos tanto en el ensayo que deberá ser aprobado como en un ensayo análogo para suero o plasma.

3.1.3. Los productos que los fabricantes destinen al autodiagnóstico, es decir, al uso doméstico, cumplirán los mismos requisitos de sensibilidad y especificidad de las ETC que los productos análogos para uso profesional. Las fases relevantes de la evaluación del funcionamiento se realizarán (o repetirán) por usuarios legos con el fin de validar el funcionamiento del producto y las instrucciones de uso.

3.1.4. Todas las evaluaciones de funcionamiento se realizarán en comparación directa con un producto que responda a los últimos adelantos. El producto de comparación utilizado deberá tener el marcado CE, si está comercializado en el momento de realizar la evaluación del funcionamiento.

3.1.5. Si se identifican resultados discrepantes de un ensayo durante una evaluación, deberán resolverse hasta donde sea posible, por ejemplo:

— evaluando la muestra discrepante mediante otros sistemas de análisis,

— utilizando métodos o marcadores alternativos,

— revisando el estado clínico y el diagnóstico del paciente, y

— analizando muestras de seguimiento.

3.1.6. Las evaluaciones de funcionamiento se realizarán sobre una población equivalente a la población europea.

3.1.7. Las muestras positivas utilizadas en la evaluación del funcionamiento se seleccionarán de modo que reflejen las diferentes fases de la enfermedad de que se trate, diferentes patrones de anticuerpos, diferentes genotipos, diferentes subtipos, mutantes, etc.

3.1.8. La sensibilidad con verdaderos positivos y muestras de seroconversión se evaluará del siguiente modo:

3.1.8.1. La sensibilidad diagnóstica del ensayo durante la fase de seroconversión debe corresponder al estado actual de la técnica. El reanálisis de los mismos paneles o de paneles adicionales de seroconversión, ya sea realizado por el organismo notificado o por el fabricante, confirmará los resultados iniciales de la evaluación del funcionamiento (véase el cuadro 1). Los paneles de seroconversión se inician con un primer resultado negativo de la muestra de sangre, tras lo cual deben analizarse muestras sucesivas en intervalos cortos hasta un primer resultado positivo.

3.1.8.2. En el caso de productos para el cribado de sangre (a excepción de los ensayos para la determinación del HBsAg y de los anti-HBc), todas las muestras verdaderas positivas serán identificadas como positivas por el producto que deba recibir el marcado CE (cuadro 1). En el caso de los ensayos para el HBsAg y los anti-HBc, el nuevo producto tendrá unos resultados globales al menos equivalentes a los del producto establecido (véase 3.1.4).

3.1.8.3. Por lo que respecta a las pruebas de VIH:

— se identificarán como positivas todas las muestras de seroconversión al VIH, y

— se someterán a prueba, como mínimo, cuarenta muestras de seroconversión temprana al VIH. Los resultados estarán de acuerdo con el estado actual de la técnica.

3.1.9. Para la evaluación del funcionamiento de las pruebas de cribado se tomarán 25 muestras positivas (si se dispone de ellas, en el caso de infecciones raras) de suero o plasma “del mismo día” (≤ 1 día después del muestreo).

3.1.10. Las muestras negativas utilizadas en la evaluación del funcionamiento reflejarán la población destinataria del ensayo, por ejemplo, donantes de sangre, pacientes hospitalizados, embarazadas, etc.

3.1.11. Para la evaluación del funcionamiento de las pruebas de cribado (cuadro 1), las poblaciones de donantes de sangre investigadas procederán de al menos dos centros de donación y las muestras deberán provenir de donaciones de sangre consecutivas no seleccionadas para excluir muestras de individuos que donan por primera vez.

3.1.12. Los productos tendrán una especificidad de al menos el 99,5 % en donaciones de sangre, salvo indicación contraria en los cuadros adjuntos. La especificidad se calculará mediante la frecuencia de resultados repetidamente reactivos (esto es, falsos positivos) en donantes de sangre negativos para el marcador diana.

3.1.13. Como parte de la evaluación del funcionamiento, se evaluarán los productos para establecer el efecto de sustancias que puedan interferir con ellos. Estas sustancias que pueden interferir dependerán hasta cierto punto de la composición del reactivo y la configuración del ensayo. Las sustancias potencialmente interferentes se identificarán como parte del análisis de riesgos exigido en los requisitos esenciales para cada nuevo producto y podrán incluir, por ejemplo:

— muestras que representan infecciones “relacionadas”,

— muestras procedentes de embarazadas multíparas, esto es, que han tenido más de un embarazo, o pacientes positivos para el factor reumatoide,

— en el caso de antígenos recombinantes, muestras con anticuerpos humanos a componentes del sistema de expresión utilizado, por ejemplo, anti-E. coli o antilevadura.

3.1.14. Para productos destinados por el fabricante a su uso en suero y plasma, la evaluación del funcionamiento debe demostrar la equivalencia entre suero y plasma. Esto se demostrará, como mínimo, para 50 donaciones (25 positivas y 25 negativas).

3.1.15. Para los productos destinados a su uso en plasma, la evaluación del funcionamiento se verificará utilizando todos los anticoagulantes que el fabricante indique aptos para emplearse con el producto. Esto se demostrará, como mínimo, para 50 donaciones (25 positivas y 25 negativas).

3.1.16. Como parte del análisis de riesgos exigido, la tasa de fallo del sistema que genera resultados falsos negativos se determinará mediante ensayos repetidos en muestras débilmente positivas.

3.1.17. Si un nuevo producto sanitario de diagnóstico in vitro de la lista A del anexo II no está cubierto específicamente por las ETC, se tendrán en cuenta las ETC de un producto afín. Un producto podrá considerarse afín por diversas razones, por ejemplo, por tener el mismo uso previsto o uno similar, o por presentar riesgos similares.

3.2. Requisitos adicionales para pruebas combinadas antígeno/anticuerpo del VIH 3.2.1. Las pruebas combinadas antígeno/anticuerpo del VIH, destinadas a la detección de anticuerpos anti-VIH y del antígeno p24, con las que se busca también la detección individual del antígeno p24, se ajustarán a lo expuesto en el cuadro 1 y el cuadro 5, e incluirán criterios de sensibilidad analítica al antígeno p24.

3.2.2. Las pruebas combinadas antígeno/anticuerpo del VIH, destinadas a la detección de anticuerpos anti-VIH y del antígeno p24, con las que no se busca la detección individual del antígeno p24 se ajustarán a lo expuesto en el cuadro 1 y el cuadro 5, y excluirán los criterios de sensibilidad analítica al antígeno p24.

3.3. Requisitos adicionales para técnicas de amplificación de ácidos nucleicos (NAT) Los criterios de evaluación del funcionamiento de los ensayos NAT pueden verse en el cuadro 2.

3.3.1. En el caso de los ensayos de amplificación de una secuencia diana, la inclusión de un control de funcionalidad para cada muestra ensayada (control interno) responderá al estado actual de la técnica. Hasta donde sea posible, este control se utilizará durante todo el proceso, esto es, extracción, amplificación/hibridación y detección.

3.3.2. La sensibilidad analítica o límite de detección de un ensayo NAT se expresará como el 95 % del valor de corte positivo. Esta es la concentración del análito para la que el 95 % de las series de ensayo dan resultados positivos tras diluciones seriadas de un material de referencia internacional, por ejemplo un estándar de la OMS, o materiales de referencia calibrados.

3.3.3. La detección del genotipo se demostrará mediante la adecuada validación del diseño de la sonda y el cebador, y también se validará analizando muestras con genotipo caracterizado.

3.3.4. Los resultados de los ensayos NAT cuantitativos serán trazables a estándares internacionales o materiales de referencia calibrados, si existen, y se expresarán en las unidades internacionales utilizadas en el ámbito específico de aplicación.

3.3.5. Los ensayos NAT pueden utilizarse para detectar virus en muestras negativas, sin anticuerpos, esto es, muestras previas a la seroconversión. Los virus incluidos en inmunocomplejos pueden comportarse de forma diferente a los virus libres, por ejemplo durante la centrifugación. Por tanto, es importante que en las evaluaciones de consistencia se incluyan muestras negativas, sin anticuerpos (muestras previas a la seroconversión).

3.3.6. Para el estudio de la contaminación por arrastre, en los estudios de consistencia se analizarán al menos cinco series alternando muestras fuertemente positivas y muestras negativas. Las muestras fuertemente positivas serán muestras con títulos altos que se produzcan de forma natural.

3.3.7. La tasa de fallo del sistema que genera resultados falsos negativos se determinará analizando muestras débilmente positivas. Las muestras débilmente positivas deberán contener una concentración de virus equivalente a tres veces el 95 % del valor de corte positivo de concentración del virus.

3.4. ETC para la liberación por el fabricante de reactivos y productos reactivos para la detección, confirmación y cuantificación en muestras humanas de marcadores de infección por VIH (VIH 1 y VIH 2), HTLV I y II, y hepatitis B, C y D (ensayos inmunológicos solamente) 3.4.1. El criterio de liberación por el fabricante garantizará que cada lote identifica de manera constante los antígenos, epítopos y anticuerpos correspondientes.

3.4.2. En los ensayos de liberación de lotes de los fabricantes para pruebas de cribado se incluirán al menos cien muestras negativas para el análito en cuestión.

3.5. ETC para la evaluación del funcionamiento de reactivos y productos reactivos para la determinación de antígenos de los siguientes grupos sanguíneos: sistema AB0: AB01 (A), AB02 (B), AB03 (AB); sistema Rhesus: Rh1 (D), Rh2 (C), Rh3 (E), Rh4 (c), Rh5 (e); sistema Kell: KEL1 (K) Los criterios para la evaluación del funcionamiento de reactivos y productos reactivos para la determinación de antígenos de los grupos sanguíneos sistema AB0: AB01 (A), AB02 (B), AB03 (AB); sistema Rhesus: Rh1 (D), Rh2 (C), Rh3 (E), Rh4 (c), Rh5 (e); sistema Kell: KEL1 (K) se indican en el cuadro 9.

3.5.1. Todas las evaluaciones del funcionamiento se realizarán en comparación directa con un producto que responda al estado actual de la técnica. El producto de comparación utilizado deberá tener el marcado CE, si está comercializado en el momento de realizar la evaluación del funcionamiento.

3.5.2. Si se identifican resultados discrepantes de un ensayo durante una evaluación, deberán resolverse hasta donde sea posible, por ejemplo:

— evaluando la muestra discrepante mediante otros sistemas de análisis,

— utilizando un método alternativo.

3.5.3. Las evaluaciones de funcionamiento se realizarán sobre una población equivalente a la población europea.

3.5.4. Las muestras positivas utilizadas para la evaluación del funcionamiento se seleccionarán para reflejar la expresión de antígenos variantes y débiles.

3.5.5. Como parte de la evaluación del funcionamiento, se evaluarán los productos para establecer el efecto de sustancias que puedan interferir con ellos. Estas sustancias que pueden interferir dependerán hasta cierto punto de la composición del reactivo y la configuración del ensayo. Las sustancias potencialmente interferentes se identificarán como parte del análisis de riesgos exigido en los requisitos esenciales para cada nuevo producto.

3.5.6. Para los productos destinados a su uso en plasma, la evaluación del funcionamiento se verificará utilizando todos los anticoagulantes que el fabricante indique aptos para emplearse con el producto. Esto se demostrará para 50 donaciones, como mínimo.

3.6. ETC para la liberación por el fabricante de reactivos y productos reactivos para la determinación de antígenos de los siguientes grupos sanguíneos: sistema AB0: AB01 (A), AB02 (B), AB03 (AB); sistema Rhesus: Rh1 (D), Rh2 (C), Rh3 (E), Rh4 (c), Rh5 (e); sistema Kell: KEL1 (K) 3.6.1. El criterio de liberación por el fabricante garantizará que cada lote identifica de manera constante los antígenos, epítopos y anticuerpos correspondientes.

3.6.2. Los requisitos de liberación de lotes por el fabricante se presentan en el cuadro 10.

Cuadro 1

Pruebas de detección anti-VIH 1 y 2, anti-HTLV I y II, anti-VHC, HBsAg, anti-HBc Anti-VIH 1 y 2 Anti-HTLV I y II Anti-VHC HBsAg Anti-HBc

Sensibilidad diagnóstica Muestras positivas 400 VIH 1 100 VIH 2

incluidos 40 subtipos distintos del B, todos los subtipos disponibles de VIH

1 deben estar representados por un mínimo de 3 muestras por subtipo

300 HTLV-I

100 HTLV-II

400 (muestras positivas)

Incluidas muestras procedentes de diferentes fases de la infección y que reflejen diversos patrones de anticuerpos.

Genotipos 1 a 4: > 20

muestras por genotipo

(incluidos subtipos del genotipo 4 distintos del a);

5: > 5 muestras;

6: si están disponibles

400

Incluida la consideración de subtipo

400

Incluida la evaluación de otros marcadores de VHB

Paneles de seroconversión 20 paneles y 10 paneles más (del organismo notificado o el fabricante)

Por definir cuando estén disponibles

20 paneles y 10 paneles más (del organismo notificado o el fabricante)

20 paneles y 10 paneles más (del organismo notificado o el fabricante)

Por definir cuando estén disponibles

Sensibilidad analítica Estándares 0,130 IU/ml (segundo estándar internacional del

HBsAg, subtipo adw2, genotipo A, código NIBSC 00/588)

Especificidad Donantes no seleccionados

(incluidos quienes donan por primera vez)

5 000 5 000 5 000 5 000 5 000

Pacientes hospitalizados 200 200 200 200 200

Muestras de sangre con posibles reacciones cruzadas (RF+, virus relacionados, embarazadas,etc.)

100 100 100 100 100

Cuadro 2

Técnicas de amplificación de ácidos nucleicos (NAT) para VIH 1, VHC, VHB, HTLV I/II (ensayos cualitativos y cuantitativos; sin tipificación molecular) VIH 1 VHC VHB HTLV I/II

Criterios de aceptación

NAT Cualitativo Cuantitativo Cualitativo Cuantitativo

Cualitativo

Cuantitativo

Cualitativo

Cuantitativo

Como en los ensayos

cuantitativos para VIH

Como en los ensayos

cuantitativos para VIH

Como en los ensayos

cuantitativos para VIH

Sensibilidad

Límite de detección

Detección de la sensibilidad

analítica (IU/ml; definido según los estándares de la OMS o materiales de referencia calibrados

De acuerdo con la directriz de validación de la FE (1): varias diluciones seriadas en el rango de concentración del valor de corte;

análisis estadístico (por ejemplo,análisis Probit)sobre al menos 24replicados; cálculo del 95 % del valor de corte

Límite de detección: como en los ensayos cualitativos. Límite de cuantificación:

diluciones (semilogarítmicas de base 10 o inferior) de preparados de referencia calibrados,

definición de límite de cuantificación inferior, superior, precisión, exactitud, intervalo

de medida “lineal”,“intervalo dinámico”. Se mostrará la reproducibilidad a diferentes niveles

de concentración

De acuerdo con la directriz de validación de la FE (1): varias diluciones seriadas en el rango de concentración del valor de corte;

análisis estadístico

(por ejemplo, análisis Probit)

sobre al menos 24 replicados;

cálculo del 95 %

del valor de corte

De acuerdo con la

directriz de

validación de la

FE (1): varias

diluciones

seriadas en el

rango de

concentración del

valor de corte;

análisis estadístico

(por ejemplo,

análisis Probit)

sobre al menos

24 replicados;

cálculo del 95 %

del valor de corte

De acuerdo con la

directriz de

validación de la

FE (1): varias

diluciones

seriadas en el

rango de

concentración del

valor de corte;

análisis estadístico

(por ejemplo,

análisis Probit)

sobre al menos

24 replicados;

cálculo del 95 %

del valor de corte

Eficacia de la

detección o

cuantificación del

genotipo o el

subtipo

Al menos 10

muestras por

subtipo (según

disponibilidad)

Diluciones seriadas

de todos los

genotipos o

subtipos

importantes,

preferentemente

de materiales de

referencia, según

disponibilidad

Al menos 10

muestras por

subtipo (según

disponibilidad)

Según

disponibilidad de

materiales de

referencia

calibrados para

genotipo

Según

disponibilidad de

materiales de

referencia

calibrados para

genotipo

VIH 1 VHC VHB HTLV I/II

Criterios de

aceptación

NAT Cualitativo Cuantitativo Cualitativo Cuantitativo

Cualitativo

Cuantitativo

Cualitativo

Cuantitativo

Como en los ensayos

cuantitativos para VIH

Como en los ensayos

cuantitativos para VIH

Como en los ensayos

cuantitativos para VIH

Sobrenadante de

cultivo celular

(sustituto posible

para subtipos de

VIH-1 atípicos)

Pueden utilizarse

transcritos o

plásmidos

cuantificados

mediante métodos

apropiados

De acuerdo con la

directriz de

validación de la

FE (1) según

disponibilidad de

materiales de

referencia

calibrados para

subtipo; los

transcritos in vitro

son una posible

opción

De acuerdo con la

directriz de

validación de la

FE (1) según

disponibilidad de

materiales de

referencia

calibrados para

subtipo; los

transcritos in vitro

son una posible

opción

De acuerdo con la

directriz de

validación de la

FE (1) según

disponibilidad de

materiales de

referencia

calibrados para

subtipo; los

transcritos in vitro

son una posible

opción

De acuerdo con la

directriz de

validación de la

FE (1) según

disponibilidad de

materiales de

referencia

calibrados para

subtipo; los

transcritos in vitro

son una posible

opción

Especificidad

diagnóstica en

muestras negativas

500 donantes de

sangre

100 donantes de

sangre

500 donantes de

sangre

500 donantes de

sangre

500 donaciones

de sangre

individuales

Marcadores con

posible reacción

cruzada

Según pruebas de

un diseño

apropiado de

ensayo (por

ejemplo,

comparación de

secuencias) o

determinación de

al menos 10

muestras positivas

para retrovirus

humanos (por

ejemplo, HTVL

Como en los

ensayos

cualitativos

Según diseño de

los ensayos o

análisis de al

menos 10

muestras positivas

para flavivirus

humanos (por

ejemplo, HGV,

YFV)

Según diseño de

los ensayos o

análisis de al

menos 10

muestras positivas

para otros virus

ADN

Según diseño de

los ensayos o

análisis de al

menos 10

muestras positivas

para retrovirus

humanos (por

ejemplo, VIH)

Consistencia Como en los

ensayos

cualitativos

VIH 1 VHC VHB HTLV I/II

Criterios de

aceptación

NAT Cualitativo Cuantitativo Cualitativo Cuantitativo

Cualitativo

Cuantitativo

Cualitativo

Cuantitativo

Como en los ensayos

cuantitativos para VIH

Como en los ensayos

cuantitativos para VIH

Como en los ensayos

cuantitativos para VIH

Contaminación

cruzada

Al menos 5 series

utilizando

alternativamente

muestras

fuertemente

positivas (que se produzcan de forma natural) y

muestras negativas

Al menos 5 series

utilizando

alternativamente

muestras

fuertemente

positivas (que se produzcan de forma natural) y

muestras

negativas

Al menos 5 series

utilizando

alternativamente

muestras

fuertemente

positivas (que se produzcan de forma natural) y

muestras

negativas

Al menos 5 series

utilizando

alternativamente

muestras

fuertemente

positivas (que se produzcan de forma natural) y

muestras

negativas

Inhibición El control interno

debe

preferiblemente

contemplar todas

las etapas del

procedimiento

NAT

El control interno

debe

preferiblemente

contemplar todas

las etapas del

procedimiento

NAT

El control interno

debe

preferiblemente

contemplar todas

las etapas del

procedimiento

NAT

El control interno

debe

preferiblemente

contemplar todas

las etapas del

procedimiento

NAT

Tasa de fallo del

sistema que genera

resultados falsos

negativos

Al menos 100

muestras

inoculadas con

virus en una

concentración de

3 veces el 95 % de

la del valor de

corte positivo

Al menos 100

muestras

inoculadas con

virus en una

concentración de

3 veces el 95 %

de la del valor de

corte positivo

Al menos 100

muestras

inoculadas con

virus en una

concentración de

3 veces el 95 %

de la del valor de

corte positivo

Al menos 100

muestras

inoculadas con

virus en una

concentración de

3 veces el 95 %

de la del valor de

corte positivo

99/100 ensayos

positivos

(1) Directriz de la Farmacopea Europea.

Nota: Los criterios de aceptación para “tasa de fallo del sistema que genera resultados falsos negativos” es de 99/100 ensayos positivos.

En el caso de NAT cuantitativos se realizará un estudio con al menos 100 muestras positivas que refleje la situación habitual de los usuarios (por ejemplo, sin selección previa de las muestras). Se generarán paralelamente resultados comparativos con otra técnica de NAT.

En el caso de NAT cualitativos se realizará un estudio de la sensibilidad diagnóstica con al menos 10 paneles de seroconversión. Se generarán paralelamente resultados comparativos con otra técnica de NAT.

Cuadro 3

Pruebas rápidas: anti-VIH 1 y 2, anti-VHC, HBsAg, anti-HBc, anti-HTLV I y II Anti-VIH 1 y 2 Anti-VHC HBsAg Anti-HBc Anti-HTLV I y II Criterios de aceptación Sensibilidad diagnóstica Muestras positivas Los mismos criterios que para las pruebas de

detección

Los mismos criterios

que para las pruebas de

detección

Los mismos criterios

que para las pruebas de

detección

Los mismos criterios

que para las pruebas de

detección

Los mismos criterios

que para las pruebas de

detección

Los mismos criterios que

para las pruebas de

detección

Paneles de

seroconversión

Los mismos criterios

que para las pruebas de

detección

Los mismos criterios

que para las pruebas de

detección

Los mismos criterios

que para las pruebas de

detección

Los mismos criterios

que para las pruebas de

detección

Los mismos criterios

que para las pruebas de

detección

Los mismos criterios que

para las pruebas de

detección

Especificidad diagnóstica Muestras negativas 1 000 donaciones de sangre

1 000 donaciones de

sangre

1 000 donaciones de

sangre

1 000 donaciones de

sangre

1 000 donaciones de

sangre

≥ 99 % (anti-HBc:

≥ 96 %)

200 muestras clínicas 200 muestras clínicas 200 muestras clínicas 200 muestras clínicas 200 muestras clínicas 200 muestras

procedentes de

embarazadas

200 muestras

procedentes de

embarazadas

200 muestras

procedentes de

embarazadas

200 muestras

procedentes de

embarazadas

100 muestras

potencialmente

interferentes

100 muestras

potencialmente

interferentes

100 muestras

potencialmente

interferentes

100 muestras

potencialmente

interferentes

100 muestras

potencialmente

interferentes

Cuadro 4

Ensayos confirmatorios o suplementarios de anti-VIH 1 y 2, anti-HTLV I y II, anti-VHC, HBsAg Ensayo confirmatorio anti-VIH Ensayo confirmatorio anti-HTLV Ensayo suplementario VHC Ensayo confirmatorio HBsAg Criterios de aceptación Sensibilidad diagnóstica Muestras positivas 200 VIH 1 y 100 VIH 2 200 HTLV I y 100 HTLV II

300 VHC (muestras positivas)

300 HBsAg Identificación correcta como positiva (o indeterminada),

no negativa

Incluidas muestras

procedentes de diferentes

fases de la infección y que

reflejen diversos patrones

de anticuerpos

Incluidas muestras

procedentes de diferentes

fases de la infección y que

reflejen diversos patrones

de anticuerpos.

Genotipos 1 a 4: > 20

muestras (incluidos subtipos del genotipo 4 distintos del a);

5: > 5 muestras;

6: si están disponibles

Incluidas muestras

procedentes de diferentes

fases de la infección

20 muestras “fuertemente

positivas” (> 26 IU/ml); 20

muestras en el intervalo

del valor de corte

Paneles de seroconversión 15 paneles de

seroconversión o paneles

de bajo título

15 paneles de

seroconversión o paneles

de bajo título

15 paneles de

seroconversión o paneles

de bajo título

Sensibilidad analítica Estándares Segundo estándar internacional del HBsAg,

subtipo adw2, genotipo A

(código NIBSC 00/588)

Especificidad diagnóstica

Muestras negativas

200 donaciones de sangre

200 donaciones de sangre

200 donaciones de sangre 1

0 muestras falsas positivas que estén disponibles de las utilizadas en la evaluación del funcionamiento de la prueba de cribado (1)

Ausencia de resultados

falsos positivos, o (1) de

neutralización

200 muestras clínicas,

también procedentes de

embarazadas

200 muestras clínicas,

también procedentes de

embarazadas

200 muestras clínicas,

también procedentes de

embarazadas

50 muestras

potencialmente

interferentes, incluidas

muestras con resultados

indeterminados en otros

ensayos confirmatorios

50 muestras

potencialmente

interferentes, incluidas

muestras con resultados

indeterminados en otros

ensayos confirmatorios

50 muestras

potencialmente

interferentes, incluidas

muestras con resultados

indeterminados en otros

ensayos confirmatorios

50 muestras

potencialmente

interferentes

(1) Criterios de aceptación: ausencia de neutralización para ensayo confirmatorio HBsAg.

Cuadro 5

Antígeno del VIH 1

Ensayo del antígeno del VIH 1 Criterios de aceptación Sensibilidad diagnóstica Muestras positivas 50 positivas al antígeno del VIH 1 50 sobrenadantes de cultivo celular, incluidos diversos subtipos del VIH 1 y el VIH-2

Identificación correcta (después de la neutralización)

Paneles de seroconversión 20 paneles de seroconversión o paneles de bajo título

Sensibilidad analítica Estándares Reactivo de primera referencia internacional para el antígeno p24 del VIH 1 (código NIBSC 90/636)

≤ 2 IU/ml

Especificidad diagnóstica 200 donaciones de sangre 200 muestras clínicas

50 muestras potencialmente interferentes ≥ 99,5 % después de la neutralización Cuadro 6

Ensayo de serotipado y genotipado del VHC Ensayo de serotipado y genotipado del VHC Criterios de aceptación Sensibilidad diagnóstica Muestras positivas 200 (muestras positivas) Incluidas muestras procedentes de diferentes fases de la infección y que reflejen diversos patrones de anticuerpos.

Genotipos 1 a 4: > 20 muestras (incluidos subtipos del genotipo 4 distintos del a); 5: > 5 muestras;

6: si están disponibles

Concordancia de ≥ 95 % entre serotipo y genotipo Concordancia de > 95 % entre genotipo y

secuenciación

Especificidad diagnóstica Muestras negativas 100

Cuadro 7

Marcadores del VHB: anti-HBs, IgM anti-HBc, anti-HBe, HBeAg Anti-HBs IgM anti-HBc Anti-HBe HBeAg

Criterios de aceptación Sensibilidad diagnóstica

Muestras positivas 100 vacunas 200 200 200 ≥ 98 % 100 personas infectadas de forma natural

Los criterios de aceptación deben aplicarse solamente a las muestras procedentes de la fase aguda de la infección.

Incluidas muestras procedentes de diferentes fases de la infección (aguda, crónica, etc.)

Paneles de seroconversión 10 seguimientos o seroconversiones anti-HBs

Cuando estén disponibles

Sensibilidad analítica Estándares Primera preparación internacional de referencia

de la OMS, 1977; NIBSC,

Reino Unido

Antígeno de referencia 82

para HBe; PEI Alemania

Anti HBs: < 10 mIU/ml

Especificidad diagnóstica Muestras negativas 500 200 donaciones de sangre 200 donaciones de sangre 200 donaciones de sangre ≥ 98 % Incluidas muestras clínicas

50 muestras

potencialmente

interferentes

200 muestras clínicas 50

muestras potencialmente

interferentes

200 muestras clínicas 50

muestras potencialmente

interferentes

200 muestras clínicas 50

muestras potencialmente

interferentes

Cuadro 8

Marcadores del VHD: anti-VHD, IgM anti-VHD, antígeno delta Anti-VHD IgM anti-VHD

Antígeno delta Criterios de aceptación

Sensibilidad diagnóstica

Muestras positivas 100 50 10 ≥ 98 %

Especificando marcadores VHB

Especificando marcadores VHB

Especificando marcadores VHB

Especificidad diagnóstica

Muestras negativas 200 200 200 ≥ 98 %

Incluidas muestras clínicas

Incluidas muestras clínicas

Incluidas muestras clínicas 50 muestras potencialmente

interferentes

50 muestras potencialmente

interferentes

50 muestras potencialmente

interferentes

Cuadro 9

Antígenos de grupos sanguíneos en los sistemas AB0, Rh y Kell 1 2 3

Especificidad Número de ensayos por método recomendado Número total de muestras que deben analizarse para lanzar un producto

Número total de muestras que deben analizarse en caso de una nueva formulación, o uso de reactivos bien caracterizados

Anti AB01 (anti-A), anti-AB02 (anti-B), anti-AB03 (anti-AB)

500 3 000 1 000

Anti-Rh1 (anti-D) 500 3 000 1 000

Anti-Rh2 (anti-C), anti-Rh4 (anti-c), anti-Rh3 (anti-E)

100 1 000 200

Anti-Rh5 (anti-e) 100 500 200

Anti-KEL1 (anti-K) 100 500 200

Criterios de aceptación:

Todos los reactivos indicados demostrarán resultados analíticos comparables con los reactivos establecidos con funcionamiento aceptable en relación con la reactividad declarada para el producto. Para los reactivos establecidos, cuando la aplicación o el uso se han cambiado o ampliado, se deben realizar otros análisis de acuerdo con los requisitos descritos en la columna 1 (arriba).

La evaluación del funcionamiento de los reactivos anti-D incluirá pruebas frente a un rango de muestras Rh1 (D) débiles y Rh1 (D) parciales, según el uso previsto del producto.

Cualificaciones:

Muestras clínicas: 10 % de la población de estudio

Muestras neonatales: > 2 % de la población de estudio

Muestras AB0: > 40 % de A, B positivos

“D débil”: > 2 % de Rh1 (D) positivos

Cuadro 10

Criterios de aprobación de lotes para reactivos y productos reactivos para la determinación de antígenos de grupos sanguíneos en los sistemas AB0, Rh y Kell Requisitos de evaluación de la especificidad para cada reactivo 1. Reactivos de ensayo

Reactivos de grupo sanguíneo Número mínimo de celdillas de control que se deben evaluar Reacciones positivas Reacciones negativas A1 A2B Ax B 0

Anti-AB01 (anti-A) 2 2 2 (*) 2 2

B A1B A1 0

Anti-AB02 (anti-B) 2 2 2 2

A1 A2 Ax B 0

Anti-AB03 (anti-AB) 2 2 2 2 4

R1r R2r D débil r’r r’’r rr

Anti-Rh1 (anti-D) 2 2 2 (*) 1 1 1

R1R2 R1r r’r R2R2 r’’r rr

Anti-Rh2 (anti-C) 2 1 1 1 1 1

R1R2 R1r r’r R1R1

Anti-Rh4 (anti-c) 1 2 1 3

R1R2 R2r r’’r R1R1 r’r rr

Anti-Rh 3 (anti-E) 2 1 1 1 1 1

R1R2 R2r r’’r R2R2

Anti-Rh5 (anti-e) 2 1 1 3

Kk kk

Anti-KEL1 (anti-K) 4 3

(*) Solo para técnicas recomendadas en las que se declara reactividad frente a estos antígenos.

Nota: Los reactivos policlonales deben probarse frente a un panel de celdillas más amplio para confirmar la especificidad y excluir la presencia de anticuerpos contaminantes indeseados.

Criterios de aceptación:

Cada lote de reactivo debe exhibir resultados inequívocamente positivos o negativos por todas las técnicas recomendadas de acuerdo con los resultados obtenidos en los datos de evaluación del funcionamiento.

2. Materiales de control (hematíes)

El fenotipo de los hematíes utilizados para el control de reactivos de tipado sanguíneo enumerados arriba debe confirmarse utilizando productos ya establecidos.».