DOUE-L-2009-82356
Europeo
Unión Europea
Decisión
20091127
886/2009

Decisión de la Comisión, de 27 de noviembre de 2009, por la que se modifica la Decisión 2002/364/CE, sobre especificaciones técnicas comunes para productos sanitarios para diagnóstico in vitro[notificada con el número C(2009) 9464].
Diario Oficial de la Unión Europea
20091204
318
L
25
40
/doue/2009/318/L00025-00040.pdf
L
N
N
N
L
Análisis
Investigación científica
Material sanitario
Normalización
Aplicable desde el 1 de diciembre de 2010 ó el 1 de diciembre de 2009, según lo indicado.
DEROGA
la Decisión 2009/108, de 3 de febrero
SUSTITUYE
el anexo de la Decisión 2002/364, de 7 de mayo
CORRECCIÓN de errores
en DOUE L 348, de 29 de diciembre de 2009.
Sanidad
Tecnología e investigación
LA COMISIÓN DE LAS COMUNIDADES EUROPEAS,
Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad Europea,
Vista la Directiva 98/79/CE del Parlamento Europeo y del Consejo, de 27 de octubre de 1998, sobre productos sanitarios para diagnóstico in vitro ( 1 ), y, en particular, su artículo 5, apartado 3, párrafo segundo,
Considerando lo siguiente:
(1) En la Decisión 2002/364/CE de la Comisión ( 2 ) se establecen las especificaciones técnicas comunes para productos sanitarios de diagnóstico in vitro.
(2) En interés de la salud pública y para adaptarse a los avances técnicos, incluida la evolución del rendimiento y la sensibilidad analítica de dichos productos, procede revisar las especificaciones técnicas comunes establecidas en la Decisión 2002/364/CE.
(3) Hay que detallar la definición de «prueba rápida» para que sea más exacta. En aras de la claridad, conviene incorporar otras definiciones.
(4) Para adaptar las especificaciones técnicas comunes a las actuales prácticas científicas y técnicas es preciso actualizar varias referencias científicas y técnicas.
(5) Deben aclararse los requisitos para las pruebas de cribado del VIH. Para garantizar que los criterios de funcionamiento acordes con la tecnología actual queden reflejados en las especificaciones técnicas comunes, hay que añadir ciertos requisitos a las pruebas combinadas antígeno/anticuerpo del VIH y detallar más los requisitos de muestreo para determinados análisis.
(6) Por consiguiente, debe modificarse en consecuencia el anexo de la Decisión 2002/364/CE y sustituirse en aras de la claridad.
(7) Debido a un error administrativo, la Decisión 2009/108/CE de la Comisión, de 3 de febrero de 2009, por la que se modifica la Decisión 2002/364/CE, sobre especificaciones técnicas comunes para productos sanitarios de diagnóstico in vitro ( 3 ), se adoptó sin dar al Parlamento Europeo la posibilidad de ejercer su derecho de control conforme al artículo 8 de la Decisión 1999/468/CE del Consejo, de 28 de junio de 1999, por la que se establecen los procedimientos para el ejercicio de las competencias de ejecución atribuidas a la Comisión ( 4 ). Por tanto, conviene sustituir la Decisión 2009/108/CE por la presente Decisión.
(8) Hay que dar a los fabricantes cuyos productos ya están en el mercado un período transitorio para que se adapten a las nuevas especificaciones técnicas comunes. Por otra parte, en interés de la salud pública, los fabricantes que lo deseen han de poder aplicar las nuevas especificaciones técnicas comunes antes de que finalice el período transitorio.
(9) Las medidas previstas en la presente Decisión se ajustan al dictamen del Comité creado en virtud del artículo 6, apartado 2, de la Directiva 90/385/CEE del Consejo ( 5 ).
________________________________
( 1 ) DO L 331 de 7.12.1998, p. 1.
( 2 ) DO L 131 de 16.5.2002, p. 17.
( 3 ) DO L 39 de 10.2.2009, p. 34.
( 4 ) DO L 184 de 17.7.1999, p. 23.
( 5 ) DO L 189 de 20.7.1990, p. 17.
HA ADOPTADO LA PRESENTE DECISIÓN:
Artículo 1
El anexo de la Decisión 2002/364/CE se sustituye por el texto que figura en el anexo de la presente Decisión.
Artículo 2
Se deroga la Decisión 2009/108/CE.
Artículo 3
La presente Decisión se aplicará a partir del 1 de diciembre de 2010 a los productos comercializados por primera vez antes del 1 de diciembre de 2009.
Se aplicará a partir del 1 de diciembre de 2009 a los demás productos.
No obstante, los Estados miembros permitirán a los fabricantes aplicar los requisitos establecidos en el anexo antes de las fechas establecidas en los párrafos primero y segundo.
Artículo 4
Los destinatarios de la presente Decisión serán los Estados miembros.
Hecho en Bruselas, el 27 de noviembre de 2009.
Por la Comisión
Günter VERHEUGEN
Vicepresidente
ANEXO
«ANEXO
ESPECIFICACIONES TÉCNICAS COMUNES (ETC) PARA PRODUCTOS SANITARIOS DE DIAGNÓSTICO IN VITRO
1. ÁMBITO DE APLICACIÓN
Las especificaciones técnicas comunes establecidas en este anexo son aplicables a los productos enumerados en la lista A del anexo II de la Directiva 98/79/CE.
2. DEFINICIONES Y TÉRMINOS
Sensibilidad (diagnóstica)
La probabilidad de que el producto dé un resultado positivo en presencia de un marcador diana.
Verdadero positivo
Muestra de la que se sabe que es positiva para el marcador diana y que el producto clasifica correctamente.
Falso negativo
Muestra de la que se sabe que es positiva para el marcador diana y que el producto clasifica incorrectamente.
Especificidad (diagnóstica)
La probabilidad de que el producto dé un resultado negativo en ausencia de un marcador diana.
Falso positivo
Muestra de la que se sabe que es negativa para el marcador diana y que el producto clasifica incorrectamente.
Verdadero negativo
Muestra de la que se sabe que es negativa para el marcador diana y que el producto clasifica correctamente.
Sensibilidad analítica
La sensibilidad analítica puede expresarse como el límite de detección, es decir, la cantidad más pequeña del marcador diana que puede ser detectada con precisión.
Especificidad analítica
La capacidad del método para determinar solamente el marcador diana.
Técnicas de amplificación de ácidos nucleicos (NAT)
El término “NAT” es utilizado para las pruebas de detección o cuantificación de ácidos nucleicos ya sea por amplificación de una secuencia objetivo, por amplificación de una señal o por hibridación.
Prueba rápida
Por “prueba rápida” se entiende productos sanitarios de diagnóstico in vitro, cualitativo o semicuantitativo, utilizados individualmente o en una serie corta, mediante procedimientos no automatizados, que han sido diseñados para proporcionar un resultado inmediato.
Consistencia
La consistencia de un procedimiento de análisis es una medida de su capacidad para no ser afectado por las variaciones pequeñas pero deliberadas de los parámetros del método, y proporciona una indicación de su fiabilidad durante el uso normal.
Tasa de fallo del sistema
La tasa de fallo del sistema es la frecuencia de fallos cuando el proceso completo se realiza según las indicaciones del fabricante.
Análisis de confirmación
Por análisis de confirmación se entiende el utilizado para confirmar un resultado reactivo de una prueba de cribado.
Análisis de tipado del virus
El que se utiliza para el tipado con muestras positivas ya conocidas, y no para el diagnóstico primario de la infección ni para el cribado.
Muestras de seroconversión al VIH
Se consideran muestras de seroconversión al VIH:
— captación del antígeno p. 24 y/o positividad del ARN del VIH,
— reconocimiento por todas las pruebas de cribado de anticuerpos,
— análisis confirmatorios positivos o indeterminados.
Muestras de seroconversión temprana al VIH Se consideran muestras de seroconversión temprana al VIH:
— captación del antígeno p. 24 y/o positividad del ARN del VIH,
— no reconocimiento por todas las pruebas de cribado de anticuerpos,
— análisis confirmatorios negativos o indeterminados.
3. ESPECIFICACIONES TÉCNICAS COMUNES (ETC) PARA PRODUCTOS DEFINIDOS EN LA LISTA A DEL ANEXO II DE LA DIRECTIVA 98/79/CE
3.1. ETC para la evaluación del funcionamiento de reactivos y productos reactivos para la detección, confirmación y cuantificación en muestras humanas de marcadores de infección por VIH (VIH 1 y VIH 2), HTLV I y II, y de hepatitis B, C y D
Principios generales:
3.1.1. Los productos para la detección de infecciones víricas deberán cumplir los requisitos de sensibilidad y especificidad expuestos en el cuadro 1 tanto si son comercializados para el cribado como si lo son para diagnóstico.
Véase también 3.1.11 en lo relativo a las pruebas de cribado.
3.1.2. Los productos que los fabricantes destinen al análisis de líquidos orgánicos distintos de suero o plasma, como por ejemplo, orina, saliva, etc., cumplirán los mismos requisitos de sensibilidad y especificidad de las ETC que los destinados al suero y el plasma. En la evaluación del funcionamiento se analizarán muestras de los mismos individuos tanto en el ensayo que deberá ser aprobado como en un ensayo análogo para suero o plasma.
3.1.3. Los productos que los fabricantes destinen al autodiagnóstico, es decir, al uso doméstico, cumplirán los mismos requisitos de sensibilidad y especificidad de las ETC que los productos análogos para uso profesional. Las fases relevantes de la evaluación del funcionamiento se realizarán (o repetirán) por usuarios legos con el fin de validar el funcionamiento del producto y las instrucciones de uso.
3.1.4. Todas las evaluaciones de funcionamiento se realizarán en comparación directa con un producto que responda a los últimos adelantos. El producto de comparación utilizado deberá tener el marcado CE, si está comercializado en el momento de realizar la evaluación del funcionamiento.
3.1.5. Si se identifican resultados discrepantes de un ensayo durante una evaluación, deberán resolverse hasta donde sea posible, por ejemplo:
— evaluando la muestra discrepante mediante otros sistemas de análisis,
— utilizando métodos o marcadores alternativos,
— revisando el estado clínico y el diagnóstico del paciente, y
— analizando muestras de seguimiento.
3.1.6. Las evaluaciones de funcionamiento se realizarán sobre una población equivalente a la población europea.
3.1.7. Las muestras positivas utilizadas en la evaluación del funcionamiento se seleccionarán de modo que reflejen las diferentes fases de la enfermedad de que se trate, diferentes patrones de anticuerpos, diferentes genotipos, diferentes subtipos, mutantes, etc.
3.1.8. La sensibilidad con verdaderos positivos y muestras de seroconversión se evaluará del siguiente modo:
3.1.8.1. La sensibilidad diagnóstica del ensayo durante la fase de seroconversión debe corresponder al estado actual de la técnica. El reanálisis de los mismos paneles o de paneles adicionales de seroconversión, ya sea realizado por el organismo notificado o por el fabricante, confirmará los resultados iniciales de la evaluación del funcionamiento (véase el cuadro 1). Los paneles de seroconversión se inician con un primer resultado negativo de la muestra de sangre, tras lo cual deben analizarse muestras sucesivas en intervalos cortos hasta un primer resultado positivo.
3.1.8.2. En el caso de productos para el cribado de sangre (a excepción de los ensayos para la determinación del HBsAg y de los anti-HBc), todas las muestras verdaderas positivas serán identificadas como positivas por el producto que deba recibir el marcado CE (cuadro 1). En el caso de los ensayos para el HBsAg y los anti-HBc, el nuevo producto tendrá unos resultados globales al menos equivalentes a los del producto establecido (véase 3.1.4).
3.1.8.3. Por lo que respecta a las pruebas de VIH:
— se identificarán como positivas todas las muestras de seroconversión al VIH, y
— se someterán a prueba, como mínimo, 40 muestras de seroconversión temprana al VIH. Los resultados estarán de acuerdo con el estado actual de la técnica.
3.1.9. Para la evaluación del funcionamiento de las pruebas de cribado se tomarán 25 muestras positivas (si se dispone de ellas, en el caso de infecciones raras) de suero o plasma “del mismo día” (≤ 1 día después del muestreo).
3.1.10. Las muestras negativas utilizadas en la evaluación del funcionamiento reflejarán la población destinataria del ensayo, por ejemplo, donantes de sangre, pacientes hospitalizados, embarazadas, etc.
3.1.11. Para la evaluación del funcionamiento de las pruebas de cribado (cuadro 1), las poblaciones de donantes de sangre investigadas procederán de al menos dos centros de donación y las muestras deberán provenir de donaciones de sangre consecutivas no seleccionadas para excluir muestras de individuos que donan por primera vez.
3.1.12. Los productos tendrán una especificidad de al menos el 99,5 % en donaciones de sangre, salvo indicación contraria en los cuadros adjuntos. La especificidad se calculará mediante la frecuencia de resultados repetidamente reactivos (esto es, falsos positivos) en donantes de sangre negativos para el marcador diana.
3.1.13. Como parte de la evaluación del funcionamiento, se evaluarán los productos para establecer el efecto de sustancias que puedan interferir con ellos. Estas sustancias que pueden interferir dependerán hasta cierto punto de la composición del reactivo y la configuración del ensayo. Las sustancias potencialmente interferentes se identificarán como parte del análisis de riesgos exigido en los requisitos esenciales para cada nuevo producto y podrán incluir, por ejemplo:
— muestras que representan infecciones “relacionadas”,
— muestras procedentes de embarazadas multíparas, esto es, que han tenido más de un embarazo, o pacientes positivos para el factor reumatoide,
— en el caso de antígenos recombinantes, muestras con anticuerpos humanos a componentes del sistema de expresión utilizado, por ejemplo anti-E. coli o anti-levadura.
3.1.14. Para productos destinados por el fabricante a su uso en suero y plasma, la evaluación del funcionamiento debe demostrar la equivalencia entre suero y plasma. Esto se demostrará, como mínimo, para 50 donaciones (25 positivas y 25 negativas).
3.1.15. Para los productos destinados a su uso en plasma, la evaluación del funcionamiento se verificará utilizando todos los anticoagulantes que el fabricante indique aptos para emplearse con el producto. Esto se demostrará, como mínimo, para 50 donaciones (25 positivas y 25 negativas).
3.1.16. Como parte del análisis de riesgos exigido, la tasa de fallo del sistema que genera resultados falsos negativos se determinará mediante ensayos repetidos en muestras débilmente positivas.
3.1.17. Si un nuevo producto sanitario de diagnóstico in vitro de la lista A del anexo II no está cubierto específicamente por las ETC, se tendrán en cuenta las ETC de un producto afín. Un producto podrá considerarse afín por diversas razones, por ejemplo, por tener el mismo uso previsto o uno similar, o por presentar riesgos similares.
3.2. Requisitos adicionales para pruebas combinadas antígeno/anticuerpo del VIH
3.2.1. Las pruebas combinadas antígeno/anticuerpo del VIH, destinadas a la detección de anticuerpos anti-VIH y del antígeno p. 24, con las que se busca también la detección individual del antígeno p. 24, se ajustarán a lo expuesto en el cuadro 1 y el cuadro 5, e incluirán criterios de sensibilidad analítica al antígeno p. 24.
3.2.2. Las pruebas combinadas antígeno/anticuerpo del VIH, destinadas a la detección de anticuerpos anti-VIH y del antígeno p. 24, con las que no se busca la detección individual del antígeno p. 24 se ajustarán a lo expuesto en el cuadro 1 y el cuadro 5, y excluirán los criterios de sensibilidad analítica al antígeno p. 24.
3.3. Requisitos adicionales para técnicas de amplificación de ácidos nucleicos (NAT) Los criterios de evaluación del funcionamiento de los ensayos NAT pueden verse en el cuadro 2.
3.3.1. En el caso de los ensayos de amplificación de una secuencia diana, la inclusión de un control de funcionalidad para cada muestra ensayada (control interno) responderá al estado actual de la técnica. Hasta donde sea posible, este control se utilizará durante todo el proceso, esto es, extracción, amplificación/hibridación y detección.
4.12.2009 ES Diario Oficial de la Unión Europea L 318/29 3.3.2. La sensibilidad analítica o límite de detección de un ensayo NAT se expresará como el 95 % del valor de corte positivo. Esta es la concentración del análito para la que el 95 % de las series de ensayo dan resultados positivos tras diluciones seriadas de un material de referencia internacional, por ejemplo un estándar de la OMS, o materiales de referencia calibrados.
3.3.3. La detección del genotipo se demostrará mediante la adecuada validación del diseño de la sonda y el cebador, y también se validará analizando muestras con genotipo caracterizado.
3.3.4. Los resultados de los ensayos NAT cuantitativos serán trazables a estándares internacionales o materiales de referencia calibrados, si existen, y se expresarán en las unidades internacionales utilizadas en el ámbito específico de aplicación.
3.3.5. Los ensayos NAT pueden utilizarse para detectar virus en muestras negativas, sin anticuerpos, esto es, muestras previas a la seroconversión. Los virus incluidos en inmunocomplejos pueden comportarse de forma diferente a los virus libres, por ejemplo durante la centrifugación. Por tanto, es importante que en las evaluaciones de consistencia se incluyan muestras negativas, sin anticuerpos (muestras previas a la seroconversión).
3.3.6. Para el estudio de la contaminación por arrastre, en los estudios de consistencia se analizarán al menos cinco series alternando muestras fuertemente positivas y muestras negativas. Las muestras fuertemente positivas serán muestras con títulos altos que se produzcan de forma natural.
3.3.7. La tasa de fallo del sistema que genera resultados falsos negativos se determinará analizando muestras débilmente positivas. Las muestras débilmente positivas deberán contener una concentración de virus equivalente a tres veces el 95 % del valor de corte positivo de concentración del virus.
3.4. ETC para la liberación por el fabricante de reactivos y productos reactivos para la detección, confirmación y cuantificación en muestras humanas de marcadores de infección por VIH (VIH 1 y VIH 2), HTLV I y II, y hepatitis B, C y D (ensayos inmunológicos solamente)
3.4.1. El criterio de liberación por el fabricante garantizará que cada lote identifica de manera constante los antígenos, epítopos y anticuerpos correspondientes.
3.4.2. En los ensayos de liberación de lotes de los fabricantes para pruebas de cribado se incluirán al menos 100 muestras negativas para el análito en cuestión.
3.5. ETC para la evaluación del funcionamiento de reactivos y productos reactivos para la determinación de antígenos de los siguientes grupos sanguíneos: sistema AB0: AB01 (A), AB02 (B), AB03 (AB); sistema Rhesus: Rh1 (D), Rh2 (C), Rh3 (E), Rh4 (c), Rh5 (e); sistema Kell: KEL1 (K) Los criterios para la evaluación del funcionamiento de reactivos y productos reactivos para la determinación de antígenos de los grupos sanguíneos sistema AB0: AB01 (A), AB02 (B), AB03 (AB); sistema Rhesus: Rh1 (D), Rh2 (C), Rh3 (E), Rh4 (c), Rh5 (e); sistema Kell: KEL1 (K) se indican en el cuadro 9.
3.5.1. Todas las evaluaciones del funcionamiento se realizarán en comparación directa con un producto que responda al estado actual de la técnica. El producto de comparación utilizado deberá tener el marcado CE, si está comercializado en el momento de realizar la evaluación del funcionamiento.
3.5.2. Si se identifican resultados discrepantes de un ensayo durante una evaluación, deberán resolverse hasta donde sea posible, por ejemplo:
— evaluando la muestra discrepante mediante otros sistemas de análisis,
— utilizando un método alternativo.
3.5.3. Las evaluaciones de funcionamiento se realizarán sobre una población equivalente a la población europea.
3.5.4. Las muestras positivas utilizadas para la evaluación del funcionamiento se seleccionarán para reflejar la expresión de antígenos variantes y débiles.
3.5.5. Como parte de la evaluación del funcionamiento, se evaluarán los productos para establecer el efecto de sustancias que puedan interferir con ellos. Estas sustancias que pueden interferir dependerán hasta cierto punto de la composición del reactivo y la configuración del ensayo. Las sustancias potencialmente interferentes se identificarán como parte del análisis de riesgos exigido en los requisitos esenciales para cada nuevo producto.
3.5.6. Para los productos destinados a su uso en plasma, la evaluación del funcionamiento se verificará utilizando todos los anticoagulantes que el fabricante indique aptos para emplearse con el producto. Esto se demostrará para 50 donaciones, como mínimo.
3.6. ETC para la liberación por el fabricante de reactivos y productos reactivos para la determinación de antígenos de los siguientes grupos sanguíneos: sistema AB0: AB01 (A), AB02 (B), AB03 (AB); sistema Rhesus: Rh1 (D), Rh2 (C), Rh3 (E), Rh4 (c), Rh5 (e); sistema Kell: KEL1 (K)
3.6.1. El criterio de liberación por el fabricante garantizará que cada lote identifica de manera constante los antígenos, epítopos y anticuerpos correspondientes.
3.6.2. Los requisitos de liberación de lotes por el fabricante se presentan en el cuadro 10.
Cuadro 1
Pruebas de detección anti-VIH 1 y 2, anti-HTLV I y II, anti-VHC, HBsAg, anti-HBc anti-VIH 1 y 2
anti-HTLV I y II anti-VHC HBsAg
anti-HBc
Sensibilidad diagnóstica Muestras positivas 400 VIH 1 100 VIH 2
incluidos 40 subtipos
distintos del B, todos los
subtipos disponibles de VIH
1 deben estar representados
por un mínimo de 3
muestras por subtipo
300 HTLV-I
100 HTLV-II
400 (muestras positivas)
Incluidas muestras
procedentes de diferentes
fases de la infección y que
reflejen diversos patrones
de anticuerpos.
Genotipos 1 a 4: > 20
muestras por genotipo
(incluidos subtipos no-a
del genotipo 4);
5: > 5 muestras;
6: si están disponibles
400
Incluida la consideración
de subtipo
400
Incluida la evaluación de
otros marcadores de VHB
Paneles de seroconversión
20 paneles y
10 paneles más (del
organismo notificado o el
fabricante)
Por definir cuando estén
disponibles
20 paneles y
10 paneles más (del
organismo notificado o el
fabricante)
20 paneles y
10 paneles más (del
organismo notificado o el
fabricante)
Por definir cuando estén
disponibles
Sensibilidad analítica
Estándares
0,130 IU/ml (segundo
estándar internacional del
HBsAg, subtipo adw2,
genotipo A, código NIBSC
00/588)
Especificidad Donantes no seleccionados
(incluidos quienes donan por primera vez)
5 000
5 000
5 000
5 000 5 000
Pacientes hospitalizados
200
200 200
200
200
Muestras de sangre con posibles reacciones cruzadas (RF+, virus relacionados, embarazadas,etc.)
100
100 100
100
100
Cuadro 2
Técnicas de amplificación de ácidos nucleicos (NAT) para VIH 1, VHC, VHB, HTLV I/II
(ensayos cualitativos y cuantitativos; sin tipificación molecular)
VIH 1
VHC
VHB
HTLV I/II
Criterios de
aceptación
NAT Cualitativo Cuantitativo
Cualitativo
Cuantitativo
Cualitativo
Cuantitativo
Cualitativo
Cuantitativo
Como en los ensayos
cuantitativos para VIH
Como en los ensayos
cuantitativos para VIH
Como en los ensayos
cuantitativos para VIH
Sensibilidad
Límite de detección
Detección de la sensibilidad analítica (IU/ml;
definido según los estándares de la OMS o materiales de referencia calibrados)
De acuerdo con la directriz de validación de la FE (1 ): varias diluciones seriadas
en el rango de concentración del valor de corte;
análisis estadístico
(por ejemplo,análisis Probit)
sobre al menos 24
replicados; cálculo
del 95 % del valor
de corte
Límite de
detección: como
en los ensayos
cualitativos. Límite
de cuantificación:
diluciones
(semilogarítmicas de base 10 o inferior) de
preparados de
referencia
calibrados,
definición de
límite de
cuantificación
inferior, superior,
precisión,
exactitud, intervalo
de medida “lineal”,
“intervalo
dinámico”. Se
mostrará la
reproducibilidad a
diferentes niveles
de concentración
De acuerdo con la
directriz de
validación de la
FE (1 ): varias
diluciones
seriadas en el
rango de
concentración del
valor de corte;
análisis estadístico
(por ejemplo,
análisis Probit)
sobre al menos
24 replicados;
cálculo del 95 %
del valor de corte
De acuerdo con la
directriz de
validación de la
FE (1 ): varias
diluciones
seriadas en el
rango de
concentración del
valor de corte;
análisis estadístico
(por ejemplo,
análisis Probit)
sobre al menos
24 replicados;
cálculo del 95 %
del valor de corte
De acuerdo con la
directriz de
validación de la
FE (1 ): varias
diluciones
seriadas en el
rango de
concentración del
valor de corte;
análisis estadístico
(por ejemplo,
análisis Probit)
sobre al menos
24 replicados;
cálculo del 95 %
del valor de corte
Eficacia de la
detección o
cuantificación del
genotipo o el
subtipo
Al menos 10
muestras por
subtipo (según
disponibilidad)
Diluciones seriadas
de todos los
genotipos o
subtipos
importantes,
preferentemente
de materiales de
referencia, según
disponibilidad
Al menos 10
muestras por
subtipo (según
disponibilidad)
Según
disponibilidad de
materiales de
referencia
calibrados para
genotipo
Según
disponibilidad de
materiales de
referencia
calibrados para
genotipo
VIH 1
VHC
VHB
HTLV I/II
Criterios de
aceptación
NAT Cualitativo Cuantitativo
Cualitativo
Cuantitativo
Cualitativo
Cuantitativo
Cualitativo
Cuantitativo
Como en los ensayos
cuantitativos para VIH
Como en los ensayos
cuantitativos para VIH
Como en los ensayos
cuantitativos para VIH
Sobrenadante de
cultivo celular
(sustituto posible
para subtipos de
VIH-1 atípicos)
Pueden utilizarse
transcritos o
plásmidos
cuantificados
mediante métodos
apropiados
De acuerdo con la
directriz de
validación de la
FE (1 ) según
disponibilidad de
materiales de
referencia
calibrados para
subtipo; los
transcritos in vitro
son una posible
opción
De acuerdo con la
directriz de
validación de la
FE (1 ) según
disponibilidad de
materiales de
referencia
calibrados para
subtipo; los
transcritos in vitro
son una posible
opción
De acuerdo con la
directriz de
validación de la
FE (1 ) según
disponibilidad de
materiales de
referencia
calibrados para
subtipo; los
transcritos in vitro
son una posible
opción
De acuerdo con la
directriz de
validación de la
FE (1 ) según
disponibilidad de
materiales de
referencia
calibrados para
subtipo; los
transcritos in vitro
son una posible
opción
Especificidad
diagnóstica en
muestras negativas
500 donantes de
sangre
100 donantes de
sangre
500 donantes de
sangre
500 donantes de
sangre
500 donaciones
de sangre
individuales
Marcadores con
posible reacción
cruzada
Según pruebas de
un diseño
apropiado de
ensayo (por
ejemplo,
comparación de
secuencias) o
determinación de
al menos 10
muestras positivas
para retrovirus
humanos (por
ejemplo, HTVL)
Como en los
ensayos
cualitativos
Según diseño de
los ensayos o
análisis de al
menos 10
muestras positivas
para flavivirus
humanos (por
ejemplo, HGV,
YFV)
Según diseño de
los ensayos o
análisis de al
menos 10
muestras positivas
para otros virus
ADN
Según diseño de
los ensayos o
análisis de al
menos 10
muestras positivas
para retrovirus
humanos (por
ejemplo, VIH)
Consistencia
Como en los
ensayos
cualitativos
VIH 1
VHC
VHB
HTLV I/II
Criterios de
aceptación
NAT Cualitativo Cuantitativo
Cualitativo
Cuantitativo
Cualitativo
Cuantitativo
Cualitativo
Cuantitativo
Como en los ensayos
cuantitativos para VIH
Como en los ensayos
cuantitativos para VIH
Como en los ensayos
cuantitativos para VIH
Contaminación
cruzada
Al menos 5 series
utilizando
alternativamente
muestras
fuertemente
positivas (que se
produzcan de
forma natural) y
muestras negativas
Al menos 5 series
utilizando
alternativamente
muestras
fuertemente
positivas (que se
produzcan de
forma natural) y
muestras
negativas
Al menos 5 series
utilizando
alternativamente
muestras
fuertemente
positivas (que se
produzcan de
forma natural) y
muestras
negativas
Al menos 5 series
utilizando
alternativamente
muestras
fuertemente
positivas (que se
produzcan de
forma natural) y
muestras
negativas
Inhibición
El control interno
debe
preferiblemente
contemplar todas
las etapas del
procedimiento
NAT
El control interno
debe
preferiblemente
contemplar todas
las etapas del
procedimiento
NAT
El control interno
debe
preferiblemente
contemplar todas
las etapas del
procedimiento
NAT
El control interno
debe
preferiblemente
contemplar todas
las etapas del
procedimiento
NAT
Tasa de fallo del
sistema que genera
resultados falsos
negativos
Al menos 100
muestras
inoculadas con
virus en una
concentración de
3 veces el 95 % de
la del valor de
corte positivo
Al menos 100
muestras
inoculadas con
virus en una
concentración de
3 veces el 95 %
de la del valor de
corte positivo
Al menos 100
muestras
inoculadas con
virus en una
concentración de
3 veces el 95 %
de la del valor de
corte positivo
Al menos 100
muestras
inoculadas con
virus en una
concentración de
3 veces el 95 %
de la del valor de
corte positivo
99/100 ensayos
positivos
(1 ) Directriz de la Farmacopea Europea.
Nota: Los criterios de aceptación para “tasa de fallo del sistema que genera resultados falsos negativos” es de 99/100 ensayos positivos.
En el caso de NAT cuantitativos se realizará un estudio con al menos 100 muestras positivas que refleje la situación habitual de los usuarios (por ejemplo, sin selección previa de las muestras). Se generarán paralelamente resultados comparativos con otra técnica de NAT.
En el caso de NAT cualitativos se realizará un estudio de la sensibilidad diagnóstica con al menos 10 paneles de seroconversión. Se generarán paralelamente resultados comparativos con otra técnica de NAT 4.12.2009 ES Diario Oficial de la Unión Europea L 318/35 Cuadro 3
Pruebas rápidas: anti-VIH 1 y 2, anti-VHC, HBsAg, anti-HBc, anti-HTLV I y II anti-VIH 1 y 2
anti-VHC
HBsAg
anti-HBc
anti-HTLV I y II
Criterios de aceptación
Sensibilidad diagnóstica
Muestras positivas
Los mismos criterios que para las pruebas de detección
Los mismos criterios que para las pruebas de detección
Los mismos criterios que para las pruebas de detección
Los mismos criterios que para las pruebas de detección
Los mismos criterios que para las pruebas de detección
Los mismos criterios que para las pruebas de detección
Paneles de seroconversión
Los mismos criterios que para las pruebas de detección
Los mismos criterios que para las pruebas de detección
Los mismos criterios que para las pruebas de detección
Los mismos criterios que para las pruebas de detección
Los mismos criterios que para las pruebas de detección
Los mismos criterios que para las pruebas de detección
Especificidad diagnóstica
Muestras negativas
1 000 donaciones de
sangre
1 000 donaciones de
sangre
1 000 donaciones de
sangre
1 000 donaciones de
sangre
1 000 donaciones de
sangre
≥ 99 % (anti-HBc:
≥ 96 %)
200 muestras clínicas
200 muestras clínicas
200 muestras clínicas
200 muestras clínicas
200 muestras clínicas
200 muestras
procedentes de
embarazadas
200 muestras
procedentes de
embarazadas
200 muestras
procedentes de
embarazadas
200 muestras
procedentes de
embarazadas
100 muestras
potencialmente
interferentes
100 muestras
potencialmente
interferentes
100 muestras
potencialmente
interferentes
100 muestras
potencialmente
interferentes
100 muestras
potencialmente
interferentes
Cuadro 4
Ensayos confirmatorios o suplementarios de anti-VIH 1 y 2, anti-HTLV I y II, anti-VHC, HBsAg Ensayo confirmatorio anti-VIH Ensayo confirmatorio anti-HTLV
Ensayo suplementario VHC Ensayo confirmatorio HBsAg
Criterios de aceptación
Sensibilidad diagnóstica Muestras positivas 200 VIH 1 y 100 VIH 2 200 HTLV I y 100 HTLV II
300 VHC (muestras positivas)
300 HBsAg
Identificación correcta como
positiva (o indeterminada),
no negativa
Incluidas muestras
procedentes de diferentes
fases de la infección y que
reflejen diversos patrones
de anticuerpos
Incluidas muestras
procedentes de diferentes
fases de la infección y que
reflejen diversos patrones
de anticuerpos.
Genotipos 1 a 4: > 20
muestras (incluidos subtipos no-a del genotipo 4);
5: > 5 muestras;
6: si están disponibles
Incluidas muestras
procedentes de diferentes
fases de la infección
20 muestras “fuertemente positivas” (> 26 IU/ml);
20 muestras en el intervalo del valor de corte
Paneles de seroconversión
15 paneles de
seroconversión o paneles
de bajo título
15 paneles de
seroconversión o paneles
de bajo título
15 paneles de
seroconversión o paneles
de bajo título
Sensibilidad analítica
Estándares
Segundo estándar
internacional del HBsAg,
subtipo adw2, genotipo A,
código NIBSC 00/588
Especificidad diagnóstica
Muestras negativas
200 donaciones de sangre 200 donaciones de sangre 200 donaciones de sangre
10 muestras falsas
positivas que estén
disponibles de las
utilizadas en la evaluación
del funcionamiento de la
prueba de cribado (1 )
Ausencia de resultados
falsos positivos, o (1 )
ausencia de neutralización
200 muestras clínicas,
también procedentes de
embarazadas
200 muestras clínicas,
también procedentes de
embarazadas
200 muestras clínicas,
también procedentes de
embarazadas
50 muestras
potencialmente
interferentes, incluidas
muestras con resultados
indeterminados en otros
ensayos confirmatorios
50 muestras
potencialmente
interferentes, incluidas
muestras con resultados
indeterminados en otros
ensayos confirmatorios
50 muestras
potencialmente
interferentes, incluidas
muestras con resultados
indeterminados en otros
ensayos confirmatorios
50 muestras
potencialmente
interferentes
(1 ) Criterios de aceptación: ausencia de neutralización para ensayo confirmatorio HBsAg.
Cuadro 5
Antígeno del VIH 1
Ensayo del antígeno del VIH 1
Criterios de aceptación
Sensibilidad diagnóstica Muestras positivas 50 positivas al antígeno del VIH 1
50 sobrenadantes de cultivo celular, incluidos diversos subtipos del VIH 1 y el VIH-2
Identificación correcta (después de la neutralización)
Paneles de seroconversión
20 paneles de seroconversión o paneles de bajo título
Sensibilidad analítica
Estándares
Reactivo de primera referencia internacional para el antígeno p. 24 del VIH 1, código NIBSC 90/ 636
≤ 2 IU/ml
Especificidad diagnóstica
200 donaciones de sangre
200 muestras clínicas
50 muestras potencialmente interferentes ≥ 99,5 % después de la neutralización
Cuadro 6
Ensayo de serotipado y genotipado del VHC Ensayo de serotipado y genotipado del VHC
Criterios de aceptación
Sensibilidad diagnóstica
Muestras positivas 200 (muestras positivas)
Incluidas muestras procedentes de diferentes fases de la infección y que reflejen diversos patrones de anticuerpos.
Genotipos 1 a 4: > 20 muestras (incluidos subtipos no-a del genotipo 4);
5: > 5 muestras;
6: si están disponibles
Concordancia de ≥ 95 % entre serotipo y genotipo Concordancia de ≥ 95 % entre genotipo y secuenciación
Especificidad diagnóstica
Muestras negativas
100
Cuadro 7
Marcadores del VHB: anti-HBs, IgM anti-HBc, anti-HBe, HBeAg anti-HBs
IgM anti-HBc
anti-HBe
HBeAg
Criterios de aceptación
Sensibilidad diagnóstica Muestras positivas 100 vacunas 200 200
200
≥ 98 %
100 personas infectadas de
forma natural
Incluidas muestras
procedentes de diferentes
fases de la infección
(aguda, crónica, etc.)
Los criterios de aceptación
deben aplicarse solamente
a las muestras procedentes
de la fase aguda de la
infección.
Incluidas muestras
procedentes de diferentes
fases de la infección
(aguda, crónica, etc.)
Incluidas muestras
procedentes de diferentes
fases de la infección
(aguda, crónica, etc.)
Paneles de seroconversión
10 seguimientos o
seroconversiones anti-HBs
Cuando estén disponibles
Sensibilidad analítica
Estándares
Primera preparación
internacional de referencia
de la OMS, 1977; NIBSC,
Reino Unido
Antígeno de referencia 82
para HBe; PEI Alemania
Anti HBs: < 10 mIU/ml
Especificidad diagnóstica
Muestras negativas
500
200 donaciones de sangre
200 donaciones de sangre
200 donaciones de sangre ≥ 98 %
Incluidas muestras clínicas
200 muestras clínicas
200 clinical samples
200 muestras clínicas
50 muestras
potencialmente
interferentes
50 muestras
potencialmente
interferentes
50 muestras
potencialmente
interferentes
50 muestras
potencialmente
interferentes
Cuadro 8
Marcadores del VHD: anti-VHD, IgM anti-VHD, antígeno delta anti-VHD
IgM anti-VHD
Antígeno delta
Criterios de aceptación
Sensibilidad diagnóstica Muestras positivas 100
50
10
≥ 98 %
Especificando marcadores VHB
Especificando marcadores VHB
Especificando marcadores VHB
Especificidad diagnóstica
Muestras negativas 200
200 200
≥ 98 %
Incluidas muestras clínicas
Incluidas muestras clínicas
Incluidas muestras clínicas
50 muestras potencialmente
interferentes
50 muestras potencialmente
interferentes
50 muestras potencialmente
interferentes
Cuadro 9
Antígenos de grupos sanguíneos en los sistemas AB0, Rh y Kell
1
2
3
Especificidad
Número de ensayos por método recomendado
Número total de muestras que deben analizarse para lanzar un producto
Número total de muestras que deben analizarse en caso de una nueva formulación, o uso de reactivos bien caracterizados Anti AB01 (anti-A), anti-AB02 (anti-B),anti-ABO3 (anti-A,B)
500
3 000
1 000
Anti-RH1 (anti-D) 500 3 000 1 000
Anti-RH2 (anti-C), anti-RH4 (anti-c), anti-RH3 (anti-E)
100
1 000
200
Anti-RH5 (anti-e)
100
500
200
Anti-KEL1 (anti-K)
100
500
200
Criterios de aceptación:
Todos los reactivos indicados demostrarán resultados analíticos comparables con los reactivos establecidos con funcionamiento aceptable en relación con la reactividad declarada para el producto. Para los reactivos establecidos, cuando la aplicación o el uso se han cambiado o ampliado, se deben realizar otros análisis de acuerdo con los requisitos descritos en la columna 1 (arriba).
La evaluación del funcionamiento de los reactivos anti-D incluirá pruebas frente a un rango de muestras Rh1 (D) débiles y Rh1 (D) parciales, según el uso previsto del producto.
Cualificaciones:
Muestras clínicas: 10 % de la población de estudio
Muestras neonatales: > 2 % de la población de estudio
Muestras AB0: > 40 % A, B positivos
“D débil”: > 2 % of Rh1 (D) positivos
Cuadro 10
Criterios de aprobación de lotes para reactivos y productos reactivos para la determinación de antígenos de grupos sanguíneos en los sistemas AB0, Rh y Kell
Requisitos de evaluación de la especificidad para cada reactivo
1. Reactivos de ensayo
Reactivos de grupo sanguíneo
Número mínimo de celdillas de control que se deben evaluar
Reacciones positivas
Reacciones negativas
A1
A2B
Ax
B
0
Anti-ABO1 (anti-A)
2
2
2 (*)
2
2
B
A1B
A1
0
Anti-ABO2 (anti-B)
2
2
2
2
A1
A2
Ax
B
0
Anti-ABO3 (anti-A,B)
2
2
2
2
4
R1r
R2r
D débil
r’r
r’r
rr
Anti-Rh1 (anti-D)
2
2
2 (*)
1
1
1
R1R2
R1r
r’r
R2R2
r’r
rr
Anti-RH2 (anti-C)
2
1
1
1
1
1
R1R2
R1r
r’r
R1R1
Anti-Rh4 (anti-c)
1
2
1
3
R1R2
R2r
r’r
R1R1
r’r
rr
Anti-RH 3 (anti-E)
2
1
1
1
1
1
R1R2
R2r
r’r
R2R2
Anti-RH5 (anti-e)
2
1
1
3
Kk
kk
Anti-KEL1 (anti-K)
4
3
(*) Solo para técnicas recomendadas en las que se declara reactividad frente a estos antígenos.
Nota: Los reactivos policlonales deben probarse frente a un panel de celdillas más amplio para confirmar la especificidad y excluir la presencia de anticuerpos contaminantes indeseados.
Criterios de aceptación:
Cada lote de reactivo debe exhibir resultados inequívocamente positivos o negativos por todas las técnicas recomendadas de acuerdo con los resultados obtenidos en los datos de evaluación del funcionamiento.
2. Materiales de control (hematíes)
El fenotipo de los hematíes utilizados para el control de reactivos de tipado sanguíneo enumerados arriba debe confirmarse utilizando productos ya establecidos.»